FluorCam затворена GFP/Chl. флуоресцентна система за изображение

FluorCamЗатворените GFP/Chl. флуоресцентни изображения могат да обслужват редица молекулярни и клетъчни биологични изследвания, прилагани към зелените флуоресцентни протеини. Филтрови колела, които се управляват напълно от софтуер и електрически задвижвани, са инсталирани на затворени системи за флуоресцентни изображения, както и серия от филтрирани комплекти, които могат да откриват и изобразяват GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP или други флуоресцентни протеини и флуоресцентини.

FluorCam затворената GFP/Chl. флуоресцентна изображетелна система също може да се използва за откриване на динамични промени и пространствено разпределение на флуоресценцията, издавана от растенията, измерване на процеса на ефекта на Каутски, флуоресцентното загасяване и други мигновени флуоресцентни процеси (транзитори) и предоставяне на 2D флуоресцентни изображения. Специално проектираната хардуерна конфигурация позволява автоматично преобразуване на системата в флуоресцентни протеини, флуоресцентни изображения или хлорофлуоресцентни изображения. Системата е силно интегрирана и може да се извърши тъмна адаптация на пробата.

Области на приложение:

Флуоресцентно откриване на флуоресцентни протеини и флуоресценти

Генен трансфер и биосензорни технологии

• Изследване на генетично модифицирани растения

• Проверка на резистентност към различни генотипи

Изследване на взаимодействията между растения и микроби

Изследване на взаимодействието между растения и животни

· Фитосинтетични свойства на растенията и скрининг на метаболитни нарушения

• Откриване на биологично и небиологично принуждение

Проучване на устойчивостта или чувствителността на растенията

Изследване на неравномерността на порите

Изследване на метаболитния хаос

• Оценка на производителността

Функционални характеристики:

· Лесна работа, регулируема височина на пробата за измерване, интегрирана специална кутия за тъмна адаптация, която улеснява обработката на тъмната адаптация на измерваните растения, операцията и т.н.

CCD с висока резолюция до 1392 x 1040 пиксела за бързо и точно улавяне на хлорофлуоресцентната и GFP

Може да се извърши автоматично повтарящо се измерване на изображението, може да се настрои експериментална програма (протоколи) за автоматично циклично измерване на изображението, данни за измерване на изображението автоматично се записват в компютъра според датата на времето (с часов печат)

• С различни общи експериментални процедури (протоколи) като индукционния ефект на Каутски, анализ на флуоресцентното загасяване, измерване на повече от 50 параметра на анализа

Модул за цветно изображение TetraCam с максимална площ на изображение 20 x 25 см за измерване на морфологията на листата или растенията

Типични проби:

• Листа, стъбла, семена, корени, цяло растение.

• Лечещи тъкани, малки садници в петриеви чинии

• Плодове и цветя

• Сини бактерии, зелени водорасли, бактерии

• Генетично модифицирани животни

Технически параметри:

• Параметри на измерване: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Повече от 50 хлорофил флуоресцентни параметри, всеки параметър може да показва 2D флуоресцентни цветни изображения

Пълна автоматична програма за измерване (протокол), свободно редактиране на автоматичната програма за измерване

a) Fv/Fm: измервателните параметри включват Fo, Fm, Fv, QY и т.н.

б) Индукция на Каутски: Флуоресцентни параметри като Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd и др.

в) Анализ на флуоресцентното загасяване: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL и други повече от 50 параметра

d) Крива за светлинен отговор LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR и други флуоресцентни параметри

е) PAR абсорбция с NDVI (по избор)

f) Реоксидантна динамика (по избор)

g) Измерване на статични флуоресцентни изображения като GFP

h) Бърз флуоресцентен динамичен анализ на OJIP (по избор): Mo (начален наклон на кривата OJIP), фиксирана площ на OJIP, Sm (измерване на енергията, необходима за затваряне на всички центрове за светлинна реакция), QY, PI и други 26 параметра

CCD сензор с висока резолюция TOMI-2

а) Постепено сканиране на CCD

Максимална резолюция на изображението: 1360 x 1024 пиксела

Времева резолюция: до 20 кадра в секунда при максимална резолюция на изображението

Резолюция за преобразуване A/D: 16 бита (65 536 сиви стъпала)

е) Размер на изображението: 6,45 µm × 6,45 µm

f) режим на работа: 1) динамичен видео режим за измерване на хлорофлуоресцентните параметри; 2) режим на снимка за измерване на флуоресцентни протеини и флуоресцентни бои като GFP

g) Режим на комуникация: Gigabit Ethernet

• Светлината плоча: 4 големи високоинтензивни пакетирани светодиодни плочи, всяка светодиодна плоча се състои от масив от 8 × 9 светодиоди, ефективната площ на светодиодната плоча е същата като площта на изображението 13 × 13 см

• Измерване на светлината: Стандартна червена светлина 617 nm, допълнителна лента за избор, регулируема продължителност от 10 µs до 100 µs

• 2 червена светлина (617nm) + 2 синя светлина (470nm), Actinic1 максимална светлинна интензивност 300 µmol (фотони) / m².s, Actinic2 максимална светлинна интензивност 2000 µmol (фотони) / m².s; Максималната оптохимична светлина може да се подобри до 3000 µmol (фотони) / m².s

• Наситена светлинна светлина: максимална светлинна интензивност 4000 µmol (фотони) / m².s, може да се надстрои до 6000 µmol (фотони) / m².s

• Размер на изображението: 13 × 13 см, за анализ на изображението на листата на растенията, растителните тъкани, водораслите, мъхът, покритието, цялото растение или няколко растения, 96 дупки, 384 дупки и др.

• Модул за измерване на GFP: 7-битово колело за филтриране и специален филтър за измерване на GFP (зелен флуоресцентен протеин)

• Модул за измерване на абсорбцията на PAR (по избор): далечно червена светлина 740nm (FAR), двуцветни светодиоди 660nm и специален филтър за измерване на абсорбцията на PAR и NDVI

• QA при анализ на оксидантната динамика на изображението (опционално): може да се извърши анализ на флуоресцентната динамика на STF с интензивност на светлината на еднократна светлина (STF) до 120 000 µmol (фотони) / m².s в 100 µs

• Модул за бърза флуоресцентна динамика на OJIP (опционално): Разрешение на времето до 1 µs, измерване и анализ на кривата на OJIP с повече от двадесет свързани параметра, включително: Fo, Fj, Fi, P или Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N (QA намалява броя на оборотите), Phi-Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (квантов поток на абсорбираща светлина в единичния реакционен център), TRo/RC (квантов поток на първоначално улавяне на светлина в единичния реакционен център), ETo/RC (квантов поток на първоначално предаване на електрони в единичния реакционен център), DIo/RC (разсейване на енергия в единичния реакционен център), ABS/CS (квантов поток на абсорбираща светлина в единичния сечение на пробата), TRo/CSo, RC/CSx (плътност на реакционен център), PIABS (индекс на "производителност" или индекс на оцеляване, базиран на квантов поток на абсорбираща светлина), PIcs (индекс на "производителност" или индекс на оцеляване, базиран на

• Ултравиолетова светодиодна плоча (по избор): 365nm или 385nm, 1) измерване на многоцветна флуоресценция (вижте FluorCam многоспектрална флуоресцентна система за изображение); 2) Измерване на wtGFP (див тип зелен флуоресцентен протеин), DAPI (4',6-диокил-2-фенилпин, флуоресцентен боядис)

• Синя светодиодна плоча (по избор): 470 nm, 1) Измерване на EGFP (усилен зелен флуоресцентен протеин); 2) Използва се за изследване на функцията на порите

• Зелен LED източник на светлина (по избор): 530 nm, измерване на YFP (жълт флуоресцентен протеин)

* Измерването на флуоресцентни протеини или флуоресцентни оцветители като wtGFP, DAPI, EGFP, YFP изисква избор на филтър

• Функции на софтуера за анализ на хлорофлуоресцентни изображения FluorCam: менюта Live, Protocols, Pre-processing, Result и др.

• Персонализирани протоколи за експериментални програми: може да се настрои времето (като измерване на продължителността на светлината, продължителността на фотохимичната светлина, времето за измерване и т.н.), интензивността на светлината (като интензивността на фотохимичната светлина с различно качество на светлината, интензивността на наситената светлина, модулирането на измерването на светлината и т.н.), има специален език и скрипт за експериментални програми, а потребителите могат да използват шаблона на съветника в менюто Протокол

• Функция за автоматичен анализ на измерванията: може да се настрои експериментална програма (протокол) за автоматично измерване на цикъла на изображението без наблюдение, броят на повторения и интервалите между измерванията могат да бъдат персонализирани от клиента, данните за измерването на изображението автоматично се записват в компютъра според датата на времето (с часов печат)

  Режим на снимка: чрез режима на снимка, можете свободно да регулирате интензивността на светлината, времето на затварянето и чувствителността, за да получите ясно изразени стабилни флуоресцентни и мигновени флуоресцентни изображения на растителни проби

• 

• Предварителна обработка на изображения: софтуерът за програмиране автоматично разпознава няколко проби от растения или няколко района или ръчно избира регион от интерес (ROI). Формата на ръчния избор може да бъде квадратна, кръгла, произволна многоъгълна или секторна. Софтуерът автоматично измерва и анализира флуоресцентната динамична крива и съответните параметри за всяка проба и избрана област с неограничен брой проби или зони (>1000)

• Режим на анализ на данни: с режим "преизчисляване на сигнала" (средна стойност на алгоритма) и режим "преизчисляване на сигнала", изберете режим "преизчисляване на сигнала" в случай на високо съотношение между сигнала и шума, изберете режим "преизчисляване на сигнала" в случай на ниско съотношение между сигнала и шума, за да филтрирате грешките, причинени от шума

• Изходни резултати: флуоресцентни динамични диаграми с висока резолюция във времето, видео за промяна на флуоресцентната динамика, файлове с флуоресцентни параметри в Excel, хистограми, диаграми с различни параметри, списъци с флуоресцентни параметри с различна възвръщаемост на инвестициите и др.

• Ширина на лентата на CCD детектора: 400-1000 nm

· Система за осветление: статична или динамична (синусова)

Спектрален отговор: най-висока квантова ефективност (70%) при 540 nm и 50% намаление при 400 nm и 650 nm

Шум от четене: по-малко от 12eRMS, типичен 10e

Пълна капацитет на капана: над 70 000 e (unbinned)

Bios: Фърмуерът може да бъде надстроен

• Начин на комуникация: Gigabit Ethernet

Размери: 471 mm (W) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Тегло: приблизително 40 кг

Въведено захранване: Approx. 1100 W

Захранващо напрежение: 90-240 V

Типични приложения:

Шанхайският институт за науки за живота използва FluorCam, за да измери получената картина на GFP, която показва, че растенията, които изразяват ярки цветове, са растения, които изразяват GFP. Колкото повече червен цвят имат, толкова повече GFP изразяват.

Контракция на коралите с бутон - разширяване в различна синхронична фаза (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) NDVI и GFP изображения анализ (Miguel, 2014)

Произход: Европа